Kā izārstēt streptokoku infekciju. Streptokoku infekcijas pārbaudes metodes

Streptococcus ģintī, Streptococcaceae ģimenē ietilpst 21 suga. Visbiežāk izraisa slimības: S.pyogenes, agalacticae, faecalis, zaļie (pneumoniae).

Piogēni streptokoki

Morfoloģija. Gr+, sfērisks vai ovāls. Uztriepes tie ir sakārtoti pa pāriem vai īsām, 6–8 šūnu ķēdēm. Viņiem ir kapsula, bet tajā iekļautā hialuronskābe nav antigēna. Viņi ir nekustīgi, neveido strīdu.

Streptokokus KULTŪVĒ uz barības vielu barotnes, kas papildināta ar glikozi, serumu vai asinīm. Uz blīvu barotņu virsmas tie veido nelielas (līdz 1 mm) bezkrāsainas kolonijas, šķidrā vidē - tuvu apakšai, parietālas augšanas, savukārt barotne ir caurspīdīga. Pēc augšanas rakstura uz asins agara tos izšķir: beta-hemolītisks - ap kolonijām veidojas caurspīdīga hemolīzes zona; alfa-hemolītisks - šaura, zaļgana zona; nehemolītisks - vide nemainās.

Tie ražo vairākus fermentus, laktāzei un saharāzei ir diferenciāldiagnostikas vērtība.

AG. Atbilstoši polisaharīda šūnu sieniņas AG sastāvam (C viela) streptokokus iedala 20 serogrupās (apzīmē ar latīņu alfabēta A–V lielajiem burtiem). Serogrupu ietvaros streptokoki tiek sadalīti serovaros (norādīti ar cipariem). Lielākā daļa streptokoku infekciju izraisītāju pieder A serogrupai.

AG īpašības piemīt šūnu sienas Ig-jaunajiem Fc receptoriem, lipoteichoic skābēm, kā arī toksīniem un enzīmiem, kas mikroorganismu reprodukcijas laikā izdalās vidē. Patogenitāti cilvēkiem nosaka toksīnu veidošanās, ārpusšūnu enzīmi un pašu baktēriju šūnu īpašības. Streptokoku izraisīto slimību saraksts ir diezgan liels: tonsilīts, hronisks tonsilīts, skarlatīns, strutaini ādas bojājumi, flegmona, sepse, nefrīts, reimatisms, otitis uc Mēģinājumi atrast atšķirīgās streptokoku pazīmes, kas izraisa tik dažādas klīniskas izpausmes. slimības bija neveiksmīgas. Tikai attiecībā uz skarlatinālo streptokoku ir konstatēts, ka tie var izdalīt eritrogēno toksīnu, citas pazīmes ir tādas pašas kā citiem SERO GRUPAS streptokokiem UN. 12. serovara streptokoki, kas ražo citotoksīnu, tiek uzskatīti par nefritogēniem.

Streptococcus serogrupa AT(S. agalactia) var izraisīt pēcdzemdību infekcijas un jaundzimušo sepsi, erozīvu stomatītu, uroģenitālās infekcijas sievietēm, sepsi, meningītu.

Ar- elpceļu infekciju, MPS slimību izraisītāji.

H un Uz- konstatēts endokardīta gadījumā.

D(enterokoki) - dzīvo vesela cilvēka zarnās, izraisa žults ceļu bojājumus, var izraisīt endokardītu, nokļūstot strutainas-iekaisīgas infekcijas brūcēs. Ar vispārinājumu - sepse.

Daži (S. mutans, S. salivarius u.c.), kas nesatur Ag grupu, dzīvo mutes dobumā. S.mutans ir iesaistīts zobu kariesa un periodonta slimību attīstībā.

Citu serogrupu streptokoki cilvēkiem ir reti sastopami.

patogenitātes faktori. Adhezīni ir lipoteicoīnskābes kompleksa lipīdu sastāvdaļa ar šūnu sienas proteīniem, kas nodrošina mijiedarbību ar epitēlija membrānu un kolonizāciju. Aizsardzību pret fagocitozi nodrošina:

1) antihemotaktiskais faktors;

2) Ig-jauns Fc receptors(uz IgG) - kavē fagocitozi, iznīcina komplementu, izraisa imūnglobulīnu nelīdzsvarotību;

3) kapsula(A un B serogrupās) - aizsargā pret fagocītiem;

4) M proteīns, ļauj augt un vairoties cilvēka asinīs, šūnas, kurām nav M-proteīna, tiek fagocitētas bez antivielu līdzdalības. M-proteīns nodrošina tādu pašu spēju iekļūt mikroorganismu šūnās un tajās vairoties.

FERMENTI: hialuronidāze (izplatīšanās faktors) un streptokināze (fibrinolizīns) - iznīcina fibrīnu, kas ierobežo lokālo iekaisuma fokusu, veicinot procesa vispārināšanu.

streptokoki SEROGRUPA A veido TOKSĪNU sēriju:

O-streptolizīns(termolabilais proteīns) - izdalās vairošanās laikā, izraisa eritrocītu līzi, iznīcina citu šūnu membrānas, kā arī lizosomu membrānas, ir kardiotoksiska iedarbība. Šis toksīns ir AG un stimulē anti-O-streptolizīna sintēzi.

S-streptolizīns(nukleoproteīns), nepiemīt antigēnas īpašības, izraisa eritrocītu līzi, iznīcina lizosomas, cilvēka šūnu mitohondriju membrānas.

Leikocidīns lizē polimorfonukleāros leikocītus, izslēdz fagocitozi.

Citotoksīni(peptīdi) - bojā šūnas. Viens no šiem toksīniem spēj bojāt nieru audus, to izdala nefritogēnie 12. serovāra streptokoku celmi.

Eritrogēns toksīns (skarlatīns). Informācija par šī toksīna veidošanos šūnā nonāk ar mērenā fāga genomu. Eritrogēnā toksīna termostabilā frakcija stimulē DTH reakciju.

Ekoloģija un izplatīšana. Piešķirt slimību izraisītājus tikai cilvēkiem, cilvēkiem un dzīvniekiem un oportūnistiskus patogēnus cilvēkiem. Viņi dzīvo mutes dobumā, uz augšējo elpceļu gļotādām, uz ādas, zarnās. Avots – pacienti un baktēriju nesēji. Izplatīšanas veids ir gaisā. Ievērojama daļa slimību ir endogēnas infekcijas, kas rodas cilvēkiem ar imūndeficīta stāvokļiem.

Vidē (uz sadzīves priekšmetiem, putekļos) tie var noturēties vairākas dienas, labi iztur žūšanu (saglabā dzīvotspēju, bet zaudē virulenci). Jutīgs pret karstumu un dezinfekcijas līdzekļiem.

Imunitāte. Streptokoku infekciju attīstību ietekmē mikroorganismu stāvoklis. Bieži slimība attīstās uz jau esošas sensibilizācijas fona (atkārtots tonsilīts, erysipelas, hroniskas infekcijas - tonsilīts, nefrīts, reimatisms). Iespējama dalība autoimūnos procesos (reimatisms). Viņiem ir hipertensija, kas krusteniski reaģē ar sirds muskuļu šķiedru sarkolemmu.

Antivielas tiek ražotas pret visiem BAS streptokokiem (toksīniem, fermentiem). Imunitāte pēc iepriekšējām infekcijām (izņemot skarlatīnu) ir vāja, un tai ir tipisks pretmikrobu raksturs (pret M-antigēnu). Antivielām pret enzīmiem, streptokoku toksīniem praktiski nepiemīt aizsargājošas īpašības. Sensibilizācijas spriedzes līmeni pārbauda alerģiskajos testos.

Laboratorijas diagnostika. BAKTERIOLOĢISKO pētījumu materiāls ir rīkles gļotas, strutas, brūču izdalījumi, asinis u.c.Identificētas izolētās tīrkultūras, noteiktas to galvenās īpašības: morfoloģija, hemolītiskā aktivitāte, jutība pret antimikrobiālajiem medikamentiem SEROLOĢISKĀ DIAGNOSTIKA - toksīnu un enzīmu antivielu noteikšana. . Ar reimatismu - anti-O-streptolizīnu, anti-DNāzes, anti-hialuronidāzes titru palielināšanās pāru serumos.

Profilakse un ārstēšana. Specifiska profilakse nav izstrādāta. Lai novērstu hroniskas streptokoku infekcijas, kas saistītas ar patogēna noturību un L-formu veidošanos, tiek izmantota antibiotiku terapija. Bērniem, kuri pārcietuši atkārtotu tonsilītu, skarlatīnu, tiek noteikta ambulatorā novērošana (reimatisma profilakse). A serogrupas streptokoki ir ļoti jutīgi pret penicilīnu (baktericīda iedarbība), rezistence pret penicilīnu netiek iegūta. Sulfonamīdiem ir bakteriostatiska iedarbība uz streptokokiem. Mikroorganismi viegli iegūst rezistenci pret tiem.

Tas ieņem īpašu vietu SCARLATINS- akūta infekcijas slimība, izraisītājs - jebkura serovara hemolītiskā streptokoka A grupa kas spēj ražot eritrogēno toksīnu.

Patoģenēze. Skarlatīns ir akūti lipīga slimība, kas notiek cikliski, mainoties simptomiem. Pirmajā posmā izpaužas eritrogēna toksīna darbība (intoksikācija, tonsilīts, punktēti izsitumi uz hiperēmijas fona).

2 periodu pavada komplikācijas darbības dēļ paši streptokoki (strutojošs limfadenīts, mastoidīts, vidusauss iekaisums), jo pretmikrobu imunitāte nav izteikta, un citu serovaru streptokoku infekcija pret kurām nav atbilstošu antivielu.

Imunitāte. Atšķirībā no citām streptokoku infekcijām saglabājas spēcīga antitoksiska imunitāte, tk. eritrogēns streptokoku toksīns visi serovari AG-bet identiski. Pretmikrobu imunitāte tipam raksturīgs un nepasargā pret citu streptokoku izraisītu slimību rašanos.

Antitoksiskās imunitātes pret eritrogēno toksīnu intensitāti pārbauda ar intradermāliem testiem. Ja nav imunitātes, mazākā toksīna deva izraisa ādas apsārtumu un pietūkumu. Ja asinīs ir antitoksīni, reakcija uz toksīna ievadīšanu nenotiek.

Streptococcus pneumoniae (PNEUMOCOCCIS). S.pneumoniae - izraisa plaušu iekaisumu - pneimoniju, kas izskaidrojams ar adhezīnu specifiku, mijiedarbojoties ar plaušu šūnu receptoriem.

Morfoloģija, fizioloģija. Viņiem ir iegarena forma, kas atgādina sveces liesmu. Sakārtoti pa pāriem, katru pāri ieskauj kapsula. Zem kapsulas atrodas M-proteīns, kas pēc īpašībām ir līdzīgs S.pyogenes, bet kam ir sava antigēna specifika.

Uz blīvām barotnēm, kurām pievieno serumu vai asinis, aug pneimokoki, veidojot nelielas kolonijas, kuras ieskauj zaļuma zona (uz asins agara). Šķidrā vidē nodrošina vienmērīgu duļķainību.

BH aktivitāte ir izteikta mēreni - tie sadala vairākus ogļhidrātus un veido hialuronidāzi, muromidāzi, peptināzi.

Viņiem ir 3 galvenie AG: polisaharīda šūnu sienas antigēns, kapsulas antigēns un M-proteīns. Saskaņā ar kapsulāro AG tie ir sadalīti 84 serovaros.

Ekoloģija un izplatīšana. Viņi dzīvo cilvēka augšējos elpceļos, iekļūst apakšējos elpceļos, un ar sastrēgumiem plaušās samazinās SIgA un makrofāgu aktivitāte, kā arī virsmaktīvās vielas iznīcināšana, rodas endogēna pneimonija. Infekcija ar gaisu.

Ārpus ķermeņa pneimokoki ātri mirst. Tie neiztur karsēšanu, dezinfekciju. Žāvētās krēpās tie var saglabāties ilgu laiku. Jutīgs pret penicilīnu, makrolīdiem.

patogenitāte. Veido hemolizīnus un leikocidīnu, bojājot audu šūnas. M-proteīns un kapsula nodrošina adhēziju un izturību pret fagocitozi. Atbrīvotajiem enzīmiem ir svarīga loma patoloģiskā procesa attīstībā: peptidāzešķeļ SIgA, hialuronidāze veicina mikroorganismu izplatīšanos audos. Pakļaujot toksīnu un fermentu iedarbībai, makrofāgi zem virsmaktīvās vielas var atstāt "aizsardzības līniju". Ir iespējams vispārināt procesu, kas biežāk sastopams maziem bērniem un gados vecākiem cilvēkiem. Šajos gadījumos rodas meningīts, sepse.

Imunitāte. Tipam raksturīgs un nestabils, tas izskaidro recidīvu un iespēju pāriet uz hronisku formu.

Laboratorijas diagnostika. Lai izolētu patogēnu šūnas, ir nepieciešams: optimāla barotne reprodukcijai, audzēšanas apstākļi, pareiza testa materiāla paraugu ņemšana. Izolētās šūnas tiek identificētas pēc vairākām pazīmēm un atšķirtas no zaļā (alfa-hemolītiskā) streptokoka, enterokoku. Iekapsulētie pneimokoki tiek pakļauti seroloģiskai tipizācijai un tiek noteikta mikroorganismu jutība pret pretmikrobu zālēm.

Profilakse un ārstēšana. Specifiska profilakse nav izstrādāta. Katrā konkrētajā gadījumā ir svarīgi veikt nespecifiskus pasākumus, lai novērstu endogēnas infekcijas iespējamību: pacientiem, kuri ir spiesti ilgstoši gulēt, kuriem tiek veikta hormonālā, staru terapija un ar kopējo rezistences samazināšanos. tiek stimulēti organisma dabiskie aizsargmehānismi (uzturs, stiprināšana, plaušu ventilācijas stiprināšana ar masāžu un citām ietekmēm). Pneimonijas ārstēšanai tiek izmantotas penicilīna, makrolīdu antibiotikas.

ENTEROKOKI. S.faecalis (fekāliju streptokoki, enterokoki) ir cilvēku un siltasiņu dzīvnieku zarnu iemītnieki. Piederēt grupai D .

Morfoloģiski- Tās ir sfēriskas vai ovālas baktērijas, daloties tās apvienojas pa pāriem vai īsās ķēdēs. Polimorfs, daži celmi ir kustīgi, tiem ir 1–4 flagellas.

Atsevišķu ogļhidrātu fermentācija ir mainīga iezīme.

Ekoloģija un izplatīšana. Enterokoki ir izturīgāki pret faktoriem vidi nekā citi streptokoki. Tie iztur karsēšanu līdz 60°C 30 minūtes un spēj vairoties vidē ar 6,5% NaCl, 40% žulti, pie pH 9,5–10,0. Kālija telurīts, nātrija azīds, žults sāļi, kristālviolete, nalidiksīnskābe, kā arī penicilīns, neomicīns neaizkavē enterokoku augšanu, ko izmanto, lai radītu selektīvu barotni.

Patoģenēze. Spēj vairoties pārtikas produktos, ēdot piesārņotu pārtiku, attīstās saindēšanās ar pārtiku. Biežāk to izraisa proteolītiskie varianti.

Strutojoši-iekaisuma procesi parasti norit gausi, hroniski. Biežāk notiek nevis monoinfekcija, bet gan jaukta, saistībā ar Escherichia coli, Proteus, stafilokokiem. S. faecalis hemolītiskie varianti tiek izolēti no strutas, kas izdalās no brūcēm, augšējiem elpceļiem, kur lokalizēti patoloģiskie procesi., proteināze, muromidāze. Ja tie tiek kultivēti laboratorijā, šie fermenti parasti vairs nav izolēti.

> Pārbaude par streptokoku infekcija

Šo informāciju nevar izmantot pašapstrādei!
Noteikti konsultējieties ar speciālistu!

Kā atpazīt streptokoku infekciju?

Ir vairāki streptokoku veidi, kas cilvēkiem izraisa iekaisuma procesus organismā. Īpaši bīstams ir B grupas beta-hemolītiskais streptokoks.Šī baktērija dzīvo nazofarneksā, kuņģa-zarnu traktā un makstī. Ir izdalīti trīs tā serovari (pasugas). 1a un III serovāra streptokoki dzīvo galvenokārt elpošanas traktā un centrālajā nervu sistēmā. Tie var izraisīt meningītu un pneimoniju jaundzimušajiem, tāpēc grūtniecēm 35 nedēļu vecumā tiek noteikti testi, lai identificētu šos mikroorganismus. A grupas beta-hemolītiskais streptokoks dzīvo galvenokārt uz ādas un gļotādām. Izraisot iekaisumu un ražojot daudzus toksīnus (hemolizīnu, streptolizīnu utt.), tas var izraisīt tonsilītu, faringītu, kā arī invazīvas slimības (miozīts, endokardīts utt.), skarlatīnu un pat toksisku šoku.

No laboratorijas metodēm streptokoku noteikšanai tiek izmantota PCR pārbaude (patogēna DNS noteikšana). Pētījuma materiāls ir asins plazma, orofarneksa epitēlija šūnu nokasīšana, siekalas, krēpas, skalošana un izņemšana no plaušām (skalošanas) šķidrums. Biomateriāla veida izvēli pētniecībai veic ārsts atkarībā no paredzamās streptokoku kolonizācijas.

Lai apstiprinātu slimības streptokoku raksturu, efektīvi nozīmētu ārstēšanu un apstiprinātu atveseļošanos, tiek kultivēts materiāls, lai noteiktu beta-hemolītiskos streptokokus, kam seko to jutības noteikšana pret antimikrobiālajiem līdzekļiem.

Tāpat, lai identificētu A un B grupas streptokokus, tiek veikti īpaši antigēnu testi. Lai šādā veidā noteiktu streptokoku A, no pacienta analīzei tiek ņemta uztriepe no orofarneksa.

Indikācijas streptokoku noteikšanai

Ārsti izraksta asins analīzi, lai noteiktu streptokoku DNS septisku stāvokļu, meningīta un akūtu pneimonijas stadiju gadījumā. Mutes un rīkles epitēlija, krēpu, mazgāšanas un skalošanas šķidruma PCR pārbaudi veic ar ilgstošu mitru klepu, ko pavada drudzis, bronhīts, tonsilīts, faringīts, rinosinusīts. Pētījumi par streptokoku ir indicēti pacientiem ar bronhopulmonārām slimībām uz pazeminātas imunitātes fona, grūtniecēm, medicīnas darbinieki personīgās medicīniskās grāmatiņas reģistrācijai.

Piešķirt testus, kas nosaka streptokoku klātbūtni, akušieri-ginekologi, pediatri, terapeiti, neirologi, pulmonologi, ķirurgi. Pētījumi tiek veikti gan daudznozaru slimnīcās, gan daudzās maksas laboratorijās.

Studiju sagatavošana

Pirms antibiotiku terapijas uzsākšanas vēlams veikt testus. Pirms diagnostisko un terapeitisko pasākumu veikšanas šajās zonās ir jāņem siekalu, krēpu, mazgāšanas, skalošanas šķidruma un materiāla paraugi no orofarneksa. Dzert un ēst vajadzētu ne vēlāk kā 2-3 stundas pirms materiāla savākšanas no orofarneksa.

Pārbaudes rezultātu interpretācija

PCR testa un antigēnu testu rezultātus A un B grupas streptokoku klātbūtnei laboratorija izsniedz formā “konstatēts” vai “nav konstatēts”. Negatīvs rezultāts visbiežāk norāda uz infekcijas neesamību, retāk - par nepietiekamu patogēna vai tā antigēnu koncentrāciju biomateriāla paraugā. Parasti pētītajos audos nedrīkst noteikt ne streptokoka DNS, ne tā antigēnus. Tomēr arī veseli cilvēki var būt streptokoku nēsātāji.

Ja sējas laikā konstatē A un B grupas beta-hemolītisko streptokoku augšanu, ārsts norāda mikroorganismu veidu, izaugušo koloniju skaitu un to jutību pret noteiktām zālēm. Parasti streptokoku augšanai nevajadzētu būt.

Ar lokālām pilienveida streptokoku infekcijām izpētes materiāls ir krēpas, nazofaringijas gļotas, strutas, skalošanas līdzekļi, brūču izdalījumi, ar izplatītām infekcijas procesa formām - asinīm un urīnu.

Laboratoriskajai analīzei tiek izmantotas mikroskopiskās, bakterioloģiskās un seroloģiskās diagnostikas metodes.

Mikroskopiskās izmeklēšanas mērķis, pazīmes un diagnostiskā vērtība ir tāda pati kā stafilokoku infekcijām.

1. BAKTERIOLOĢISKAIS PĒTĪJUMS

Lai izolētu streptokoku tīrkultūru, ir svarīgi izveidot optimālu barotni, jo streptokoki tai izvirza īpašas prasības. Viņiem ir nepieciešams ievērojams daudzums ogļhidrātu un dabisko olbaltumvielu. Tāpēc streptokoku infekcijām kopā ar vispārpieņemto cukuru BCH, asins MPA, piena-sāls MPA un BCH (skatīt receptes iepriekš), tiek izmantota ascītiskā un seruma barotne.

ASCITIC MPB un MPA sagatavo, pievienojot ziņošanas šķidrumu, kas iegūts sterilā no vēdera dobuma pacientiem ar terapeitisku un ķirurģisku profilu. Šķidrumu karsē 3 dienas +56-58°C 1 stundu, sterilizē filtrējot caur Seitz filtru vai pievieno 40% glicerīnu un uzglabā aukstumā. Lai pagatavotu ascīta buljonu un ascīta agaru, 1 daļu šķidruma sajauc ar 2-3 daļām MPB (vai Hotingera buljona) vai izkausētu un atdzesētu MPA.

WHEY BCH gatavo no vienkārša, svaiga gaļas-peptona buljona pH 7,6, kura 1 daļai pievieno 2 daļas svaiga cilvēka vai zirga seruma. Serumu inaktivē +56°C temperatūrā 30 minūtes pirms pievienošanas barotnei.

Ar pilienu streptokoku infekciju komplikāciju ar sepsi ir nepieciešamas arī asins kultūras. Asins bakterioloģiskai izmeklēšanai E. G. Kassirskaja iesaka kompleksi izmantot trīs veidu uzturvielu substrātus, kas inokulēti ar ātrumu 1 daļa patoloģiskā materiāla uz 10-15 barotnes daļām. Kā pēdējo izmanto 0,2% pusšķidru agaru ar 10% ascītisko šķidrumu, Levintāla buljonu ar asinīm un Kitt-Tarozzi aknu barotni.

LEVINTĀLA buljonam atsevišķi gatavo šādas sastāvdaļas: Nr.1 ​​- 100 ml maltas gaļas pievieno 300 ml destilēta ūdens un 10 ml parastā sodas šķīduma; Nr.2 - 0,5 g pankreatīna izšķīdina 20-30 ml ūdens ar 2 ml 1 N sodas šķīduma un 10 ml hloroforma; Nr.3 - nātrija fosfāta buferšķīdums destilētā ūdenī (atšķaidījums 8:1000). pH tiek noregulēts uz 5,6-6 ar HCl šķīdumu.

Pirmajā dienā maisījumu Nr.1 ​​inkubē termostatā + 37 °C 1-2 stundas, pievieno tam šķīdumu Nr.2, samaisa un tur tādos pašos apstākļos vēl 24 stundas. Trauku ar barotni periodiski sakrata. Pēc tam ņem vienādos daudzumos gaļas mīkstumu un buferšķīdumu Nr. 3. Uzvāra, filtrē. pH ir iestatīts uz 7,2-7,4. Viņi atkal vārās. Ielej mēģenēs un sterilizē 2 dienas pēc kārtas 30 minūtes ar plūstošu tvaiku.

TREŠDIENA KITT-TAROZZI gatavo no liellopu aknām vai gaļas. Pēdējos sagriež gabaliņos, nosver, pārlej ar trīskāršu MPB daudzumu (pH-7,4-7,6) un vāra 30 minūtes. Tad buljonu filtrē, aknu gabalus mazgā ar krāna ūdeni. Tālāk 1 atm spiedienā sterilizē mēģenes ar 3-4 aknu gabaliņiem, kas pildīti ar 7-8 ml filtrāta un vazelīna eļļas slāni. 30 minūšu laikā.

Lietojot PUSŠĶIDRU GAROZZI AGARU, palielināsies streptokoku iesēšana: Mārtiņa buljonam (pH-7,6-7,8) pievieno 0,3-0,5% glikozes un 0,1-0,15% agara-agara. Aknu vai vārītas gaļas gabalus ievieto sterilās mēģenēs, pievieno 9 ml barotnes un sterilizē +120 °C 30 minūtes.

Zaļais streptokoks, kas ir izolēts no septiskā endorkardīta, attīstās ļoti lēni. Šajā sakarā asins kultūras tiek turētas 2-3 dienas termostatā.

Dažos gadījumos streptokoku kultūru nav iespējams izolēt ar plašu aerāciju. Veiksmīgāka ir anaerobiozes izmantošana. Lai izveidotu pēdējo, varat izmantot trīs vienkāršas metodes.

I. PĒTĪJUMA MATERIĀLU IESĒJĀ mēģenē ar 0,25% glikozes buljonu un ātri iesūc sterilās Pastēra pipetēs, kuru galus nekavējoties noslēdz virs degļa liesmas. Pipetes tiek uzstādītas vertikāli termostatā. Pēc 24 stundām pipetēm tiek nolauzti apakšējie gali (streptokoki aug tikai apakšā), pirmos pilienus izmanto mikroskopijai un tālākai patogēna tīrkultūras izolēšanai.

2. KULTŪRU AUDZĒŠANA AR OGLEKĻA DIOKSĪDU PIESĀTĪTĀ ATMOSFĒRĀ. Nepieciešamo CO 2 koncentrāciju iegūst, pievienojot 1 g bikarbonāta sodas uz 1 litru tilpuma eksikatorā, kas piekrauts ar mēģenēm, un pēc tam no tā paša aprēķina 8-9 ml 10% H 2 SO 4 vai HCl.

3. Pavisam vienkāršs un mazāk efektīvs ir šāds paņēmiens: brīvi noslēgta eksikatora apakšā novieto aizdegtu sveci. Tas deg 1-3 minūtes un nodziest. Pirmās vai otrās procedūras beigās eksikatorus pārklāj ar vākiem, kuru malas iesmērē ar vazelīnu un ievieto termostatā.

Tīrkultūras izolācija

Streptokoku bioķīmiskā aktivitāte ir nestabila, un tās noskaidrošanai nav diagnostiskas vērtības. Streptokoku pētījums šajā sakarā tiek izmantots tikai diferenciācijai ar enterokokiem (1. tabula).

1. tabula. Streptokoku diferenciācija no enterokokiem
Šermana kritēriji, lai atšķirtu A grupas streptokokus (patiesus) no D grupas (entrokokiem)
Pārbaudes Grupas
A grupa (streptokoki) D grupa (enterokoki)
Ķēdes garumsgarš (5-12 saites)īss (1-2 saites)
Sāls MPA pieaugums no 6,5%+ -
D. E. Belenkija žults-asins MPA augšana līdz P. N. Popovai- +
Augšana pienā ar metilēnzilo- + (samazinājums)
Augšana uz MPB ar pH - 9,6 (0,05 M Na 2 CO 3 šķīduma klātbūtnē)- +
jutība pret penicilīnu+ -
Karstumizturība pie +60 °C 30 minūtes.- +

Šim nolūkam izmantoto diferenciāldiagnostikas mediju sastāvs ir šāds.

  • ŽULTS UN ŽULTS-ASINS MPA D. 3. Belenky un N. N. Popova tiek pagatavoti no kausēta un filtrēta 3% MPA ar jebkuru buljona bāzi. 60 ml šī MPA pievieno 40 ml dabiskās filtrētas žults, ielej flakonos un sterilizē 1 atm spiedienā. 30 minūtes. Lai sagatavotu asins agaru, šim žults MPA pievieno 5% defibrinētas asinis.
  • PIENU AR METILĒNZILU gatavo no vājpiena sterilā vājpiena, kura 100 ml pievieno 2 ml 10% metilēnzilā ūdens šķīduma.

STREPTOKOKU VIRULENCES NOTEIKŠANA

Lai pierādītu streptokoku patogenitāti, svarīga ir hialuronidāzes aktivitāte, streptokināzes vai fibrinokināzes noteikšana, plazmas koagulāze, streptokoku leikotoksiskā iedarbība un hemolizīna klātbūtne. Šo rādītāju noteikšana tiek veikta saskaņā ar iepriekš aprakstītajām metodēm, bet streptokoka hemolizējošās aktivitātes noteikšana ir labāka uz barotnēm ar cilvēka asinīm.

LEIKOCIDĪNA DEFINĪCIJA. Cilvēkam vai jebkuram dzīvniekam ņem citrētas asinis, centrifugē, ar pipeti atsūc augšējo dzelteno leikocītu slāni, pārnes citā mēģenē un pagatavo 2-5% leikocītu suspensiju. Pēdējo ielej 1-1,5 ml šaurās mēģenēs. Šeit pievieno arī 1 cilpu 1-2 miljardu streptokoku ikdienas kultūras un ievieto termostatā +37 ° C temperatūrā uz 1 stundu. Pēc inkubācijas no leikocītu-mikrobu masas pagatavo uztriepes (līdzīgi kā uztriepes no pilnasinīm), žāvē un fiksē 15 minūtes. Ņikiforova maisījumā, krāso 45-60 minūtes pēc Romanovska-Giemsa, mikroskopēts. Milzīga leikocītu iznīcināšana norāda uz leikocidīna klātbūtni.

Izolētu kultūru JŪTĪBAS NOTEIKŠANA pret ārstnieciskām vielām tiek veikta ar tradicionālajām metodēm.

Atklāto streptokoku seroloģiskā tipēšana pēc to izolēšanas ir nepieciešama tikai īpašiem epidemioloģiskiem nolūkiem, un to izmanto reti.

II. STEPTOKOKU INFEKCIJAS DIAGNOSTIKAS SEROLOĢISKĀ METODE

Streptokoku virulences enzīmi (hialuronidāze, fibrinokināze, plazmakoagulāze) un to toksīni (piemēram, hemotoksīns) ir spēcīgi antigēni, uz kuriem reaģējot, tiek ražotas atbilstošās antivielas: antihialuronidāze, antistreptokināze, antistreptolizīns utt. Nosakot šīs antivielas, ir iespējams diagnosticēt slimību un infekcijas procesa fāzes attīstību.

ANTISTREPTOLIZĪNA (ANTIHEMOLIZĪNA) NOTEIKŠANA

Streptolizīns ir hemotoksīna veids. Tās klātbūtne tiek pārbaudīta pēc eritrocītu masas. Reaģējot uz šī antigēna darbību, organismā veidojas antivielas, kas var neitralizēt tā hemolītisko aktivitāti. Ja tiek konstatēts antistreptolizīns, ir nepieciešams: pacienta serums ar antistreptolizīniem (antivielām); streptolizīns (attīrīts), standarta, liofilizēts; 5% truša, aitas vai cilvēka eritrocītu suspensija; fosfāta buferšķīdums serumu atšķaidīšanai un eritrocītu suspensijas pagatavošanai: 7,6 NaCl, 3,17 g KH 2 P0 4 un 1,81 g Na 2 HPO 4 izšķīdina 1 litrā destilēta ūdens, pa pilienam pievieno koncentrētu NaOH un pH noregulē uz 6,5- 6.7. Buferšķīdumu uzglabā ledusskapī -4 °C temperatūrā 2-3 nedēļas.

Antistreptolizīna definīcija sastāv no diviem posmiem: pirmais ir standarta streptolizīna titra un darba devas noteikšana, otrais ir antistreptolizīna noteikšana un kvantitatīva noteikšana. To īstenošanas shēmas ir norādītas zemāk.

Standarta streptolizīna darba devas noteikšanas shēma
Sastāvdaļas ml mēģenes
1 2 3 4 5 6 7
(eritrocītu kontrole)
Streptolizīns0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 1,1 -
buferšķīdums0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 1,5
Eritrocītu apturēšana0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5
Termostatā 15 minūtes pie +37 °C, krata, atkal termostatā 30 minūtes.
Rezultāts- - - - hemolīzehemolīze-

Streptolizīna titru un darba devu uzskata par tā minimālo daudzumu, kas nodrošināja skaidru eritrocītu hemolīzi. Šajā piemērā tie ir vienādi ar 1,0 ml.

AT pēdējie laiki tiek ražots standarta liofilizēts stretolizīns, uz pudeles, ar kuru un pievienotajā instrukcijā norādīta zāļu atšķaidīšanas metode, lai iegūtu darba devu. Šāds streptolizīns nodrošina labu rezultātu atkārtojamību.

Reakcijas shēma antistreptolizīna noteikšanai
Sastāvdaļas ml mēģenes
1 2 3 4 Kontrole
5 6
streptolizīns eritrocīti
buferšķīdums0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5
Pacienta serums1:50 1:100 1:200 1:400 1:800 -
Streptolizīns darbā. devu.1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 -
Krata, termostatā + 37 °C 15 minūtes.
Eritrocītu apturēšana0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5
Termostatā 45 minūtes +37 °C, laiku pa laikam sakratot.
Rezultāts- - hemolīzehemolīzehemolīze-

Antistreptolizīns šajā pacienta seruma paraugā tika konstatēts titrā 1:200.

ANTIGIALURONIDĀZES NOTEIKŠANA

Noteikšanas princips ir balstīts uz hialuronidāzes enzīma destruktīvās iedarbības uz hialuronskābes substrātu reģistrāciju. Pacienta serumā esošās antivielas, kas vērstas pret šo fermentu, to neitralizē un hialuronskābe paliek nemainīga.

Nepieciešamie reaģenti: pacienta serums ar antivielām (antihialuronidāze); hialuronskābes ekstrakts ar zināmu darba devu (iepriekš aprakstītā metode); hialuronidāze (ķīmiski tīras zāles); 15% etiķskābe - indikators; fizioloģiskais šķīdums.

Antihialuronidāzes noteikšana sastāv no trim posmiem: pirmais ir hialuronskābes titra un darba devas noteikšana, otrais ir hialuronidāzes noteikšana, trešais ir antihialuronidāzes klātbūtnes un titra noteikšana.

Hialuronskābes substrāta titrēšana ir aprakstīta iepriekš. Standarta hialuronidāzes titrs un darba deva atbilst minimālajam daudzumam, kas var iznīcināt darba devā uzņemto hialuronskābi.

Pēc hialuronidāzes titra noteikšanas nosaka antihialuronidāzes titru.

Seruma antihialuronidāzes titra noteikšanas reakcijas iestatīšanas shēma
Sastāvdaļas ml mēģenes
1 2 3 4 5 6 Kontrole
7 8
hialuronidāze hialuronskābe
Fizik. risinājums0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,7
Pacienta serums atšķaidīts 1:25 1:50 1:100 1:200 1:400 1:800 1:1600
Hialuronidāze darba devā0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 -
Termostatā + 37°C 30 minūtes.
Hialuronskābe darba devā0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3
Termostatā +37 °C 30 minūtes. 15% etiķskābe 2-3 pilieni mēģenē.
rezultātusreceklisreceklisreceklis- - - - receklis

Šajā piemērā antihialuronidāzes titrs pacienta serumā ir 1:200. Šis antivielu daudzums norādītajā seruma atšķaidījumā joprojām neitralizē hialuronidāzi un novērš hialuronskābes iznīcināšanu. Tās integritāti reģistrē, veidojot trombu pēc indikatora pievienošanas - 15% etiķskābes šķīduma.

  1. Djačenko S.S. Mikrobioloģiskās metodes infekcijas slimību diagnosticēšanai. Ukrainas PSR Gosmedizdat, 313. lpp.
  2. Infekcijas slimību mikrobioloģijas, klīnikas un epidemioloģijas ceļvedis. Ed. "Medicīna", VI sēj., sek. VI, 440.–474., 489.–500. lpp. (enterokoki).
  3. Infekcijas slimību mikrobioloģiskās diagnostikas vadlīnijas, izd. K. I. Matvejeva un M. I. Sokolova, 450. lpp.
  4. Sačkovs V. I. Imunoloģiskās metodes reimatisma un citu kolagēna slimību pētīšanai. Medgiz, M., 1962.
  5. Ioffs M.F. Reimatisma imunoloģija. Medgiz, M., 1961.

Avots: Motavkina N.S., Pjanova R.E. Dažu pilienu infekciju un toksoplazmozes mikrobioloģiskā diagnostika. Metodiskā izstrāde skolēniem. VSMU, 1973. gads

Infekcijas slimības izraisa dažādi mikroorganismi, starp kuriem ievērojamu daļu aizņem baktērijas. Jo īpaši streptokoki. Tās ir sfēriskas, grampozitīvas, anaerobas baktērijas, kas pārsvarā dzīvo uz cilvēka gļotādām. Daudzos gadījumos tiek noteikta streptokoku infekcijas analīze, un tas ir vienīgais līdzeklis patogēna identificēšanai, ja ir aizdomas par slimības bakteriālu cēloni.

Kādos gadījumos tiek veikta diagnostika? Pirmkārt, ar stenokardiju un faringītu, dažām citām augšējo elpceļu slimībām. Baktērijas nosaka ar infekcijas slimības zarnas, dažos gadījumos ar mīksto audu, kaulu infekciju, sepsi.

Papildus tiek nozīmēta streptokoku infekciju laboratoriskā diagnostika, ja ir aizdomas par baktēriju pārnēsāšanu, ārstniecības iestāžu darbiniekiem tiek ņemti skrāpējumi.

Nozokomiālas infekcijas gadījumā ir obligāta streptokoku analīze, kā arī citu patogēno baktēriju identificēšana.

Antibiotiku terapijas laikā tiek veikti arī testi, lai novērtētu terapijas efektivitāti. Kā preventīvs pasākums var noteikt pārbaudi pirms hospitalizācijas.

Diagnostikas metodes

Mūsdienās patogēna identificēšanai var izmantot dažādus pētījumus. Visbiežāk izmantotās metodes ir:

  • bakterioloģiskā;
  • seroloģiskās;
  • eksprestestēšana;
  • PCR diagnostika.

Katrai no šīm metodēm ir sava specifika un iespējas, lai gan precizitātes ziņā tās visas ir vienlīdz informatīvas.

Bakterioloģiskā metode

To sauc arī par sēšanu. Pētījuma laikā no pacienta paņemto biomateriālu ievieto Petri trauciņā ar uzturvielu barotni – ogļhidrātu un dabīgā proteīna maisījumu. Sējai izmanto trīs. dažādi veidi substrāts, no kuriem katrs ir piemērots noteikta veida baktērijām.

Tālāk Petri trauciņus ievieto speciālā termostatā un tur tajā noteiktu laiku. Pēc tam tiek pētīts rezultāts – uz barības vielu barotnēm veidojas baktēriju kolonijas. Parasti streptokoki veido apaļas kolonijas, kas atkarībā no baktēriju grupas var būt blāvas, spīdīgas vai gļotainas.

Šāda analīze tiek veikta, lai no grupas izolētu vienu patogēnu - galu galā katrā biomateriālā ir daudz patogēnu vai ne patogēnu mikroorganismu. Skaidrs, ja streptokoku koloniju ir visvairāk, tad slimību izraisa tas.

Dažādas bakterioloģiskās analīzes ir anaerobioze. Biomateriālu ievieto mēģenē ar uzturvielu buljonu, bet bez skābekļa. Šādos apstākļos var attīstīties tikai anaerobās baktērijas, tostarp streptokoki. Priekšrocība ir tāda, ka visi aerobie mikroorganismi tiek nekavējoties nogriezti, un tas palielina diagnozes precizitāti un vairākas reizes vienkāršo to.


Seroloģiskā metode

To izmanto arī streptokoku infekcijas noteikšanai, taču tiek ņemts vērā nevis patogēna daudzums, bet gan antivielu daudzums pret to. Kā zināms, cilvēka organismā pret jebkuru mikroorganismu tiek ražotas antivielas, kas novērš briesmas. Jo vairāk to asinīs, jo vairāk baktēriju. Tas ir seroloģiskā pētījuma pamatā.

Streptokoka gadījumā tiek noteikts antivielu daudzums pret O tipa streptolizīnu, ko šīs baktērijas izdala. Tā ir šī viela, kas izraisa cilvēka ķermeņa šūnu iznīcināšanu.

Atkarībā no konstatēto antivielu daudzuma var saprast ne tikai slimības cēloni, bet arī iekaisuma procesa smagumu – jo vairāk to ir, jo vairāk streptokoku organismā.

PCR

Saīsinājums apzīmē polimerāzes ķēdes reakciju. Šī ir salīdzinoši jauna metode, kas ir slavena ar savu precizitāti. Pētījuma pamatā ir specifisku streptokoku DNS fragmentu noteikšana. Ja pētījums atklāj šim patogēnam raksturīgo gēnu secību, nav šaubu.

Kā tas ir iespējams? PCR ļauj izveidot daudzas DNS kopijas, izmantojot DNS polimerāzes enzīmu. Šajā gadījumā ir iespējams identificēt patogēnu agrīnās slimības stadijās, noteikt tā daudzumu biomateriālā. Metode ir patiešām informatīva, šajā ziņā tā pārspēj visus citus.

Polimerāzes ķēdes reakcijas trūkums ir augstākas analīzes izmaksas, taču to kompensē izcila precizitāte, kas daudzos gadījumos ir kritiska.

Ātrā diagnostika

Ja streptokoka tests ir jāveic ātri, un tas ir nepieciešams daudzos gadījumos, labākais risinājums būtu veikt uztriepi, kam seko ātra diagnoze. Tas ļauj noteikt diagnozi 5 minūšu laikā un nerada nopietnas neērtības.

Kā un ar kādu palīdzību tiek veikta ātrā pārbaude? No pacienta tiek ņemts biomateriāls (tiek veikts kaklā ar vates tamponu). Pēc tam kociņu nolaiž mēģenē ar īpašu šķīdumu, atstāj tajā 1 minūti. Pēc tam nūju izvelk, nodzīvo mēģenē, pēc tam testa sloksni tur nolaiž uz 5 minūtēm. Pēc šī laika novērtējiet rezultātu.


Šāds pētījums netiek izmantots visur, lai gan tas ir ērti, tas ļauj diagnosticēt infekciju tieši ārsta kabinetā. Iemesls ir tāds, ka testa strēmeles var sniegt nepatiesu rezultātu. Tāpēc, pat ja diagnoze tika veikta, diagnozes precizēšanai joprojām tiek veikta baktēriju kultūra.

Izmantotie biomateriāli

Streptokoku infekciju mikrobioloģisko diagnostiku var veikt, izmantojot:

  • krēpas;
  • nazofaringijas gļotas;
  • strutas;
  • mazgāšana no gļotādām;
  • izdalījumi no brūces;
  • uztriepes no maksts;
  • spermatozoīdi;
  • urīns;
  • fekālijām.

Konkrētais biomateriāla veids tiek noteikts pēc pieņēmuma diagnozes - ja ir aizdomas par urīnpūšļa iekaisumu, tad veic urīna analīzi un, ja mazulim ir acīmredzamas zarnu infekcijas pazīmes (izkārnījumi, paaugstināts drudzis), tad baktērija tiek noteikta izkārnījumos.

Analīzes atšifrēšana

Neatkarīgi no tā, cik vecs ir pacients, vai tas ir pieaugušais, pusaudzis vai zīdainis, katram biomateriāla veidam ir noteikta streptokoka satura norma.

Visbiežāk sastopamā streptokoku infekcijas diagnoze ir baktēriju kultūra. Tā rezultātu novērtējums tiek veikts, skaitot. Parasti baktēriju saturs nedrīkst pārsniegt 10 līdz 4 vai 10 līdz 7 pakāpi, atšķirības nav, tiek aprēķinātas streptokoku koncentrācijas siekalās, uztriepe no rīkles vai dzemdes kakla kanāla.

Par patoloģiju liecina koncentrācija, kas lielāka par 10 līdz 7. Nav nozīmes, vai tiek sēts Agalactica streptococcus vai kāds cits, piemēram, Viridans streptococcus. Jo vairāk baktēriju skaits atšķiras no 7. pakāpes, jo izteiktāks ir patoloģiskais process.

Jums vajadzētu koncentrēties uz šādām atsauces vērtībām:

  • negatīvs rezultāts (nav baktēriju augšanas) - nav infekcijas;
  • pozitīvs rezultāts ar vērtību līdz 10 no 7 - asimptomātiska pārvadāšana;
  • pozitīvs rezultāts ar vērtību, kas pārsniedz 10 no 7, ir akūta infekcija.

Jāņem vērā, ka pētījuma rezultātus vienmēr ietekmē antibiotiku terapija, tādēļ, ja pacients ir lietojis kādas zāles, par to ir vērts zināt. Tomēr tieši tāpēc bakposevu izmanto, lai noteiktu antibiotiku efektivitāti un baktēriju jutību pret tām.

Vai nepieciešama ārstēšana

Noteikti, ja ir iekaisuma process nepieciešama terapija. Nesējstāvokļa gadījumā, kas iestājas bez jebkādiem simptomiem, antibiotiku nepieciešamību nosaka ārsts, pamatojoties uz konstatēto mikroorganismu skaitu – ja tas nepārsniedz augstāk minētos rādītājus vai ir daudz zemāks, var iztikt bez ārstēšanas.

Gadījumos, kad baktēriju skaits tuvojas normas augšējai robežai, tiek veikta terapija, īpaši, ja ir aizdomas par imunitātes samazināšanos vai pastāv infekcijas attīstības risks.